Strojenie ze słuchu jest to najłatwiejsza do nauczenia się oraz najpowszechniej stosowana metoda strojenia gitary bez użycia elektroniki. Polega na porównywaniu dźwięków wydawanych przez struny.

Pierwszą strunę stroimy korzystając z innego instrumentu (np. keyboardu) , a jeśli go nie posiadamy, musimy zaopatrzyć się w kamerton. Jeśli mamy inny instrument, porównujemy dźwięk E wydawany przez ten instrument z dźwiękiem pustej struny E1 (najcieńszej). Natomiast jeśli posiadamy kamerton, porównujemy dźwięk wydawany przez niego z dźwiękiem tej samej struny, tylko że naciśniętej na piątym progu. Kręcimy kluczem tak długo, aż dźwięki porównywane będą identyczne.

Kiedy mamy już nastrojoną strunę E1, możemy przystąpić do strojenia kolejnych strun. Naciskamy strunę H2 - następną - na piątym progu, uderzamy i porównujemy z dźwiękiem wydawanym przez pustą strunę E1. Podobnie jak w przypadku poprzedniej struny oraz każdej innej, którą będziemy stroić, kręcimy kluczem, dopóki dźwięki nie będą brzmiały identycznie.

Następną strunę - G3 - wyjątkowo naciskamy na czwartym progu zamiast na piątym. Uderzamy, po czym porównujemy z dźwiękiem pustej struny H2. Kolejne struny: D4, A5 oraz E6 (najgrubszą) stroimy tak samo jak strunę H2, czyli porównujemy dźwięk wydawany przez daną strunę naciśniętą na piątym progu z dźwiękiem pustej struny poprzedniej.